Paso 15: Avanzado análisis genético DIYBio: extracción de ADN
Los genetistas más profesional, me incluyo, tienen el lujo de tener un grado de investigación o instalaciones GLP para hacer análisis de laboratorio en. Aunque no me funcionan los proyectos DIYBio en, me permitirse la posibilidad de familiarizarme con las técnicas de biología molecular antes de intente recrearlos en casa.
Por el momento, las técnicas más difíciles para hacer en casa es también uno de los más básicos para la comprensión de la genética, la extracción de ADN y la reacción en cadena de la polimerasa (PCR).
Varios usuarios de Instructables han publicado ya sobre la extracción de ADN de DIY. Cada método tiene ventajas y desventajas y son en última instancia, no como laboratorio eficiente o libre de contaminantes como estándar técnicas utilizando columnas de sílice o granos magnéticos. El método más fácil para los biólogos DIY utiliza Punzones de papel, similares a tarjetas de punto, de la sangre que utiliza el calor (de un termociclador de PCR) como el principal método de extracción de ADN sin embargo, también es el menos eficiente debido a la introducción de los inhibidores de la polimerización en cadena (para humano ADN, sangre o mejilla hisopos pueden aplicarse al papel). El otro método popular para los biólogos DIY utiliza detergentes y el alcohol, un proceso más difícil porque los dos líquidos son miscibles, pero dos ' ibles aquí y aquí hacen un excelente trabajo de explicarla. También puede experimentar con otros detergentes/proteasas, he visto jabón, champú y ablandador de la carne de todos utiliza.
Personalmente soy parcial al método alcohol y detergente/proteasa para mayor eficiencia y rendimiento, pero debe usarse gran cuidado para minimizar la contaminación y la contaminación de alcohol y detergentes/proteasas. Los efectos de arrastre pueden ser minimizados mediante el uso de herramientas de transferencia esterilizadas (15 minutos en una olla a presión con agua destilada) y completamente secado el precipitado de DNA en un ambiente estéril (google una técnica estéril, una lámpara de alcohol puede sustituirse por un mechero de Bunsen en la mayoría de las aplicaciones).
Biólogos de DIY Super pueden subir su juego mediante la construcción de un espectrofotómetro para cuantificar su ADN. No cubra esto aquí, pero usted puede cualquier aspecto a modificar uno de los Laboratorios públicos o siguiendo uno de los varios instructables en él. De cualquier manera, tendrás que construir para que aceptará las cubetas con el líquido en ellos.
