Paso 2: Anatomía de un microscopio
Anatomía de un microscopio
Este paso es sobre las diferentes partes de un microscopio. (Si usted ya sabe o quiere ensuciarse las manos, guardar este bit para más adelante).
El tipo de microscopio que vamos a usar es un microscopio compuesto óptico diseñado para la visualización de las muestras por 'transmisión de luz'. Eso significa que la luz pasa a través de la muestra en lugar de ser reflejada por él.
Un microscopio compuesto utiliza una combinación de un objetivo y en ocular. El objetivo se centra en una imagen real del objeto dentro del tubo del microscopio que luego es ampliado por el ocular para dar una imagen ampliada del objeto. Esta imagen aparece invertida. Usando una combinación de dos ópticas, se logra un aumento mayor y objetivos pueden ser intercambiados para que varios factores de ampliación diferentes están disponibles en un solo dispositivo.
Factores de ampliación de la gama de lentes del objetivo de 3 x a 100 x, de oculares de 5 x a 15 x. La ampliación total así va desde aprox. 15 x 1500 x. Sin embargo, rara vez usarás factores de aumento que son muy altas, debido a alta magnificación, la imagen no es muy aguda y tiene poco contraste.
Objetivos también tienen un parámetro llamado apertura numérica (abreviado como NA) grabado en ellos. Similar a la abertura en las lentes de fotografía, este es el parámetro de determinación de la energía de ese objetivo y es cuanta luz permite pasar a través de él. Generalmente va desde 0.1 para un objetivo 3 x 1,4 1.25 o incluso para un objetivo de 100 x.
Objetivos de Ampliación baja como 8 x, 10 x o 15 x se utilizan para encuestas ásperos, por ejemplo, en botánica y entomología. Sistemas biológicos estándar generalmente incluyen 10 x, 40 x y 100 objetivos x, un objetivo adicional de 20 x a menudo resultará valioso.
Cartilla de Sterrenburg en microscopia recomienda una rutina buena set dando pasos manejables aumento de x 2 sería como sigue: 10 x / NA 0,25 o 0,3; 20 x / NA 0,45; 40 x / NA 0.65; 100 x / NA 1.25 o 1.3
La mayoría de los microscopios se compone de los mismos componentes estructurales.
- Ocular (lente ocular)
- Marco de la
- Torreta de objetivos, revólver o giratorio pieza de nariz (para mantener múltiples lentes del objetivo)
- Lentes del objetivo
- Perillas de enfoque (para mover el escenario)
- A: ajuste grueso de
Condensadores
El microscopio tiene dos intercambiables diferentes condensadores; uno tradicional y un condensador de campo oscuro. La función del condensador es llenar el objetivo uniformemente con un cono de luz. Este cono de luz es estrecho para un objetivo de apertura baja pero debe ser muy amplia para una alta apertura. El condensador le permiten ajustar el ancho del código mediante el ajuste de la distancia entre el condensador y la muestra. Partes del objetivo que no recibe luz no pueden participar plenamente en la formación de la imagen!
Sin un condensador, la luz proveniente de la fuente de iluminación no se distribuya uniformemente y lanzar la imagen del filamento de bombilla en nuestra muestra. También introducirá artefactos como el resplandor y la sombra en la imagen. Mientras que hay otros métodos de difusión de la luz como el difusor de cristal opal también difunden la imagen del filamento, todos estos reducen la intensidad de la iluminación. Nuestra adecuada "Iluminación de Köhler" sin embargo logra distribución uniforme, asegurando que la imagen de la fuente de luz es defocused perfectamente en el plano de la muestra.
Iluminación de campo oscuro
Un gran desventaja de microscopía óptica de transmisión es el bajo contraste: es necesario utilizar rebanadas muy delgadas que dejan a menudo la mayoría de la luz pase a través. Así, lo que obtienes es una imagen brillante con muy poco contraste y a veces puede ser muy difícil de hacer algunas de las características que buscas. Por esta razón personas han ideado diferentes métodos para realzar el contraste de imágenes microscópicas. Mientras que la coloración (es decir. Agregar colorante y luego lavado de la muestra) es la forma más fácil y más común, algunos métodos lograr resultados notables sin cambiar su muestra, únicamente mediante la manipulación de la luz.
Parte del bloque de condensadores de campo oscuro de la luz que proviene directamente de la fuente de luz antes de que llegue la muestra, pero deja un anillo externo de la iluminación a través de la que ilumina la muestra desde el lado. (Similar a cómo en una habitación con las cortinas dibujadas casi durante un día soleado a excepción de una raja estrecha, partículas de polvo diminutas se hacen visibles en el haz de luz del sol.) Solamente la luz dispersada se va a producir la imagen, mientras que se bloquea la luz transmitida directamente.
Esta técnica es particularmente adecuada para muestras biológicas que son muy transparentes como organismos unicelulares u otros organelos al agua. Mientras que bajo luz normal que sean objetos justos apenas visibles sobre un fondo blanco brillante, aparecen como objetos brillantes sobre un fondo negro cuando se utiliza la microscopia de campo oscuro.
Mientras que este microscopio tiene un condensador de campo oscuro, no ser usando este tiempo. Pronto a venir sin embargo. Mientras tanto, familiarizarse con el hardware a mano.
Ahora, vamos a ensuciar nuestras manos...
Fuentes:
En la foto del libro es: "Das Mikroskop" por el Dr. Ludwig Otto, 1952
"Cartilla de microscopia" por Frithjof A. S. Sterrenburg http://www.microscopy-uk.org.uk/index.html?http :/ /...
