Paso 3: Datos en bruto Cellecting
Si teñidas de múltiples colores, que es lo que hice, tenemos que separar para analizar uno por uno. Me stianed con DAPI, un colorante nuclear para identificar células individuales (azul) y para B1-integrinas (rojo). Sólo quiero medir la expresión de la integrina B1 para separar los colores he seguido estos pasos:
"Imagen" -> "Color"--> "Split Channels"
Esto me dio tres canales (ahora todos mostrando en imágenes grises), un canal rojo, azul y verde. El canal rojo tenía mi mancha de integrina, azul tenía la tinción DAPI, y verde era ayudenme ya que no mancha para nada verde esta vez. Sólo necesitaba el rojo, por lo que cerré las otras dos ventanas.
Ahora zoom mi celular que mi cursor sobre la celda y haciendo clic en la flecha hacia arriba en mi teclado. Luego selecciona la herramienta "selecciones a mano alzada" (el botón con forma de riñón) y se indica mi celular como se muestra. Entonces, para tomar medidas, sólo Haz clic en "m" en su teclado. Se abrirá una ventana con nuestras mediciones deseados que elegimos anteriormente en ellos.
Ahora tenemos que tomar medidas para nuestro fondo. Así que selecciona la herramienta "rectangular" y seleccionar una parte del fondo, asegurándose de que sólo circulan por el espacio vacío y no en otras células. Haga clic en "m" otra vez. Hacer esto tres veces total así que tenemos tres medidas de fondo en un promedio de.
